1.0目標(biāo)

確保該批產(chǎn)品是無(wú)菌的或已滅菌。

2.0范圍

該程序適用于所有腸胃外藥物劑型和說(shuō)明書(shū)中提及的任何特定材料。

3.0責(zé)任

3.1工作：技術(shù)助理（微生物學(xué)家）/行政人員
3.2檢查：主管/經(jīng)理

4.0問(wèn)責(zé)制

部門(mén)主管。

5.0程序

5.1無(wú)菌測(cè)試的媒體準(zhǔn)備

5.1.1按照SOP制備的液體硫乙醇酸培養(yǎng)基。
5.1.2按照SOP進(jìn)行大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基的制備。

5.2中等增長(zhǎng)促進(jìn)試驗(yàn)

5.2.1 按照方法進(jìn)行生長(zhǎng)促進(jìn)測(cè)試。

5.3除胰島素以外的材料和產(chǎn)品的滅菌測(cè)試程序

5.3.1按照SOP和玻璃器皿，在121°C的高壓滅菌器中消毒所有必需的配件，以進(jìn)行無(wú)菌測(cè)試30分鐘，并用DHS在180°C的鑷子/切割器切割2小時(shí)。按照SOP進(jìn)行玻璃器皿的清潔和消毒。
5.3.2進(jìn)入無(wú)菌測(cè)試室，并按照SOP的禮服程序進(jìn)行操作。
5.3.3將無(wú)菌室的紫外線燈“關(guān)閉”，將日光燈“打開(kāi)”。
5.3.4按照SOP
5.3.5 操作LAF 。用70％過(guò)濾IPA擦拭LAF工作臺(tái)。
5.3.6在測(cè)試之前，用70％過(guò)濾的IPA消毒樣品容器的外表面，并使其干燥。
5.3.7暴露介質(zhì)板并根據(jù)SOP進(jìn)行區(qū)域監(jiān)控，以進(jìn)行環(huán)境監(jiān)控。

5.3.8無(wú)菌試驗(yàn)的樣品量

對(duì)于成品：每批或每批20個(gè)容器。
對(duì)于批量樣品：2X50 ml無(wú)菌容器中的樣品。
5.3.9將過(guò)濾組件布置在LAF中，并將其與真空管線/真空泵連接。
5.3.10在無(wú)菌鑷子的幫助下，將無(wú)菌的0.45µ膜置于過(guò)濾器支架上，并正確夾緊。
5.3.11在另一個(gè)LAF中，借助無(wú)菌注射器從安瓿瓶/小瓶/瓶中收集樣品溶液到無(wú)菌瓶中。對(duì)于干粉或凍干的容器，加入無(wú)菌水/ 0.1％蛋白ept溶解液，然后將其收集在無(wú)菌燒瓶中。
5.3.12在真空的幫助下，通過(guò)0.45µ 濾膜無(wú)菌過(guò)濾收集的溶液。
5.3.13如果測(cè)試樣品具有任何抗微生物特性/防腐劑，則用3X100 ml新鮮制備的無(wú)菌0.1％蛋白ept作為沖洗溶液進(jìn)行過(guò)濾。
5.3.14同時(shí)執(zhí)行0.1％蛋白p水或用于沖洗過(guò)濾器的任何其他稀釋劑的無(wú)菌測(cè)試。
5.3.15過(guò)濾完成后，打開(kāi)組件，并用無(wú)菌切刀將濾膜切成兩等份。
5.3.16用無(wú)菌鑷子在液體硫代乙醇酸酯培養(yǎng)基中無(wú)菌接種一半濾膜，在大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基中接種另一半濾膜。保留每種培養(yǎng)基一根試管，不要接種–ve對(duì)照。
5.3.17轉(zhuǎn)移培養(yǎng)基試管，使其穿過(guò)孵化器進(jìn)入培養(yǎng)箱。
5.3.18孵育時(shí)間和溫度如下。
A）巰基乙酸液體培養(yǎng)基：根據(jù)所需藥典在30 – 35°C下孵育不少于14天。
B）大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基：根據(jù)所需藥典在20-25°C下孵育不少于14天。
5.3.19 經(jīng)驗(yàn)證的濕熱法對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行zui終滅菌的產(chǎn)品，應(yīng)將樣品保溫7天以上。
5.3.20每天觀察培養(yǎng)液中微生物生長(zhǎng)的存在（濁度）或不存在（清晰），并按附件一記錄下來(lái)
。I.5.3.21檢查含防腐劑的產(chǎn)品，抑菌和抑菌產(chǎn)品的生長(zhǎng)促進(jìn)特性。完成5.5的無(wú)菌測(cè)試潛伏期，并記下觀察結(jié)果。

5.4胰島素消毒程序

5.4.1按照5.3.1至5.3.17的所有步驟。
5.4.2如果懸浮，將胰島素晶體溶解在無(wú)菌的20％抗壞血酸（約50ml）中。
5.4.3孵育時(shí)間和溫度如下。
A）硫代乙醇酸液體培養(yǎng)基：NLT 14天為30 – 35°C
B）大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基：NLT 14天為20 – 25°C
5.4.4每天觀察培養(yǎng)液中是否存在（混濁）或不存在（澄清）微生物生長(zhǎng)并記下附件中的觀察結(jié)果-I.
注意：對(duì)于胰島素zui終產(chǎn)品，將結(jié)果記錄在胰島素zui終產(chǎn)品數(shù)據(jù)表
5.4.5中，按照5.5的規(guī)定，在孵育14天后檢查培養(yǎng)基的促生長(zhǎng)特性
5.5在培養(yǎng)期結(jié)束后檢查培養(yǎng)基的促生長(zhǎng)特性以進(jìn)行無(wú)菌性測(cè)試。
5.5.1潛伏期結(jié)束后，將每種培養(yǎng)基分散在三個(gè)試管中。分別在以下培養(yǎng)基中接種測(cè)試生物（約100 cfu / ml）。
1）巰基乙酸液體培養(yǎng)基：（用于需氧和厭氧細(xì)菌）
銅綠假單胞菌 -ATCC – 9027金黃色葡萄球菌-ATCC –
6538
Cl.sporogenes-ATCC – 1437
在30 – 35°C下孵育2 – 3天。
2）大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基：（用于細(xì)菌和真菌）金
黃色葡萄球菌-ATCC – 6538
白色念珠菌-ATCC – 10231
A.niger-ATCC – 16404
在20 – 25°C下孵育5天
5.5.2接受標(biāo)準(zhǔn)：培養(yǎng)基應(yīng)在其潛伏期內(nèi)對(duì)其生長(zhǎng)做出反應(yīng)。
5.5.3觀察培養(yǎng)的培養(yǎng)基試管以促進(jìn)生長(zhǎng)并記下觀察結(jié)果。
注意：對(duì)于胰島素成品，將結(jié)果記錄在胰島素成品數(shù)據(jù)表中

5.6盲測(cè)（控制測(cè)驗(yàn)）

5.6.1用無(wú)菌注射用水進(jìn)行無(wú)菌試驗(yàn)。
5.6.2請(qǐng)遵循步驟5.3.1至5.5.4。
5.6.3記錄觀察結(jié)果。
5.6.4頻率：每周進(jìn)行一次此測(cè)試，然后每六個(gè)月與其他人進(jìn)行交叉檢查。
5.6.5驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)：測(cè)試樣品應(yīng)符合無(wú)菌測(cè)試
。5.6.6結(jié)合測(cè)試結(jié)果的解釋。
1）如果樣品通過(guò)無(wú)菌測(cè)試，則分析人員有資格進(jìn)行無(wú)菌測(cè)試。
2）如果樣品在無(wú)菌測(cè)試中失敗，則分析人員需要對(duì)無(wú)菌測(cè)試進(jìn)行再培訓(xùn)。
5.7無(wú)菌試驗(yàn)的觀察和解釋
5.7.1如果沒(méi)有發(fā)現(xiàn)生長(zhǎng)的跡象，則所檢查的制劑通過(guò)了無(wú)菌試驗(yàn)。
5.7.2如果發(fā)現(xiàn)了微生物生長(zhǎng)的證據(jù)，則保留顯示該細(xì)菌的容器，除非并且通過(guò)任何其他方式證明其存在是由于與所檢查的制劑無(wú)關(guān)的原因，否則無(wú)菌測(cè)試無(wú)效且應(yīng)進(jìn)行對(duì)相同數(shù)量的樣本進(jìn)行重新測(cè)試。
5.7.3如果在重新測(cè)試中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)微生物生長(zhǎng)的跡象，則所檢查的制劑通過(guò)了無(wú)菌測(cè)試。
5.7.4如果在重新測(cè)試中發(fā)現(xiàn)微生物生長(zhǎng)的跡象，則所檢查的制劑未通過(guò)無(wú)菌測(cè)試。
5.7.5根據(jù)IP如果沒(méi)有發(fā)現(xiàn)微生物生長(zhǎng)的跡象，則所檢查的制劑符合無(wú)菌測(cè)試。
5.7.6如果發(fā)現(xiàn)微生物生長(zhǎng)的證據(jù)，則所檢查的制劑不符合無(wú)菌測(cè)試。除非可以清楚地表明測(cè)試對(duì)與所檢查的準(zhǔn)備無(wú)關(guān)的原因無(wú)效，否則不要重復(fù)測(cè)試。
5.7.7僅當(dāng)滿足以下一個(gè)或多個(gè)條件時(shí)，測(cè)試才認(rèn)為無(wú)效。
5.7.7.1如果在陰性對(duì)照中發(fā)現(xiàn)微生物生長(zhǎng)。
5.7.7.2無(wú)菌測(cè)試設(shè)施的微生物監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)顯示出故障。
5.7.7.3對(duì)所涉及測(cè)試所用測(cè)試程序的審查發(fā)現(xiàn)了一個(gè)故障。
5.7.7.4在識(shí)別出從容器中分離出的微生物后，顯示出微生物的生長(zhǎng)，可以毫無(wú)疑問(wèn)地將生長(zhǎng)歸因于進(jìn)行測(cè)試程序所用的材料和/或技術(shù)的缺陷。
5.7.8如果測(cè)試被宣布為無(wú)效，請(qǐng)重復(fù)與原始測(cè)試相同的單位數(shù)。在重復(fù)測(cè)試中未發(fā)現(xiàn)微生物生長(zhǎng)的跡象，所檢查的制劑符合無(wú)菌測(cè)試。在重復(fù)試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)其微生物生長(zhǎng)，并在顯微鏡下確認(rèn)，所檢查的制劑不符合無(wú)菌試驗(yàn)。

6.0縮寫(xiě)

6.1 ATCC =美G典型培養(yǎng)物收集
6.2 IP =印度藥典
6.3 LAF =層流氣流
6.4 UV =紫外線
6.5 IPA =異丙醇