樣品過濾故障排除
在大多數(shù)情況下,我們制備樣品的原因是導(dǎo)致我們在過濾過程中遇到的問題。本文介紹了一些提示和技巧,這些技巧和竅門將幫助您解決過濾樣本中由于使用PVDF注射器過濾器和其他任何可能使用的過濾器而可能忽略的問題。
在為您的工作準(zhǔn)備樣品時(shí),樣品過濾無處不在,因?yàn)樗荚谙M(jìn)樣前的顆粒。我們大多數(shù)人都會(huì)忽略這一事實(shí)。過濾器主體是使用各種材料構(gòu)造而成的,與應(yīng)用程序一起使用的溶劑將決定您選擇使用哪種。
化學(xué)相容性
您的供應(yīng)商將幫助您選擇與您的應(yīng)用化學(xué)兼容的過濾器材料,因?yàn)橹挥猩贁?shù)子集材料。例如,當(dāng)使用有機(jī)溶劑或其他具有極端pH值的溶劑時(shí),應(yīng)確保不會(huì)發(fā)生濾膜崩解。
允許任何滲濾液是色譜圖內(nèi)干擾的原因,特別是在使用光譜檢測器時(shí),干擾會(huì)影響分析的質(zhì)量和數(shù)量。如果您懷疑是否存在瀝出液,則需要使用1毫升等分試樣沖洗,這對于大多數(shù)過濾器來說通常就足夠了-可以對其進(jìn)行預(yù)清洗。
分析物結(jié)合
分析物的結(jié)合/吸附是您可能會(huì)遇到的另一個(gè)問題。它能夠?qū)Τ绦虻亩繄?zhí)行產(chǎn)生影響。吸附度隨過濾器類型而變化,樣品基質(zhì)將決定變化。
玻璃纖維和尼龍顯示出與肽和蛋白質(zhì)的高度結(jié)合,而聚醚砜(PES)和聚偏二氟乙烯(PVDF)氟化物通常是理想的。諸如聚四氟乙烯(PTFE)和PVDF的親水膜往往對重量更輕的分子分析物產(chǎn)生zui小的非特異性結(jié)合。因此,在開發(fā)方法時(shí),應(yīng)始終對這些過濾器的綁定進(jìn)行一些調(diào)查。通過嘗試使用未過濾和過濾后的樣品,您的儀器對每種分析物有何反應(yīng),就可以做到這一點(diǎn)。
預(yù)濾器
有些分析物充滿了顆粒。在這種情況下,容易進(jìn)行的處理將需要預(yù)過濾器,以使其下方的多孔膜連續(xù)流動(dòng)。這樣的注射器被稱為多層注射器,其具有允許樣品多通過五次的能力。請注意,大量的預(yù)過濾器實(shí)際上是玻璃纖維,這將使蛋白質(zhì)過濾成為不可能。因此,您應(yīng)該選擇使用PES或PVDF預(yù)過濾器構(gòu)造材料的過濾器。
選擇適合您的應(yīng)用的過濾器尺寸也至關(guān)重要。大直徑的過濾器將使樣品快速流動(dòng),而無需太大的壓力且堵塞更少。但是,要為更高的可提取水平,較大的滯留體積以及更高的非特異性分析物結(jié)合可能性做好準(zhǔn)備。選擇PVDF針頭過濾器或任何其他具有適當(dāng)孔隙率和合適的過濾器孔徑(用于UHPLC分析的孔徑為2um)的過濾器至關(guān)重要。
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